вируссодержащего материала использовали культуральную жидкость, собранную из инфицированных ВГС культур клеток почки эмбриона свиньи (СПЭВ) на стадии развития цитопатических явлений. Титр вируса 7,5 lg ТЦИД50.
Вирус гриппа А. В качестве источника вируса использовали штамм вируса гриппа человека А/H1N1 (Титр вируса 6,5 lg ТЦИД50, культура клеток почек собаки [MDCK]), из Государственной коллекции вирусов «Института вирусологии им. Д. И. Ивановского» ФГБУ «НИЦЭМ им Н. Ф. Гамалеи» Минздрава России.
Вирус герпеса простого (ВПГ). В качестве источника вируса простого герпеса тип 1, штамм Л2 (ВПГ-1), из Государственной коллекции вирусов «Института вирусологии им. Д. И. Ивановского» ФГБУ «НИЦЭМ им. Н. Ф. Гамалеи» Минздрава России. Титр вируса 4,5 lg ТЦИД50.
Клетки. В работе с вирусами использовали следующие перевиваемые культуры клеток: для вируса полиомиелита – клетки почки зеленых мартышек Vero, аденовируса – линию клеток человека HeLa, для ВИЧ – лимфобластоидные клетки человека МТ-4, для вируса гепатита С – культуру клеток почки эмбриона свиньи (СПЭВ), для вируса гриппа А человека – клетки почки собаки (MDCK). Для работы с вирусом простого герпеса использовали культуру клеток Vero и культуру диплоидных фибробластов человека М-19.
Структура исследования. Вирулицидный эффект испытуемых средств исследовали в суспензионном тесте (тест in vitro) и на различных тест-объектах, являющихся реальными объектами приложения средства или суррогатными аналогами. Основными способами обработки контаминированных вирусом тест-объектов были протирание, орошение и погружение. Суспензионный тест является исторически исходным тестом выявления вирулицидных свойств дезинфектанта и заключается в смешивании вируса с испытуемым средством в соотношении 1:9 (по отечественным нормативам) или 1:8 (в зарубежной практике) [3, 5].
Чувствительные культуры клеток инфицировали вирусом, подвергшимся воздействию ДС; инкубировали их при оптимальной температуре и определяли наличие или отсутствие инфекционного вируса. Контролями служили пробы вируса, собранные с контаминированных вирусом тест-объектов, не подвергшихся действию дезинфицирующих средств. Репродукцию вируса в клетках оценивали по вирусиндуцированному цитопатическому эффекту микроскопическим или МТТ-методом.
Критерии учета результатов испытаний: эффект вирулицидного действия ДС оценивали по степени ингибирования инфекционного вируса, измеряемого в lg ТЦИД50 (50 %-я тканевая цитопатическая инфекционная доза). Критерием эффективности является степень ингибирования репродукции вируса, которая должна быть не менее 4,0 lg ТЦИД50.
Расчет концентрации ДВ в растворе проводили по формуле:
Х = (С × М)/100,
где Х – искомая концентрация ДВ в растворе, %; С – концентрация рабочего раствора по препарату, рекомендованная в инструкции, %; М – количество ДВ в средстве, указанное в Инструкции по применению, % [6].
3. Результаты исследования
3.1. Катионные поверхностно-активные вещества
Катионные
